Das einzige Kunstmuseum im Bezirk Südböhmen.
Die Galerie spezialisiert sich auf Sammlungen gotischer Werke aus Südböhmen, dem Böhmerwald (Šumava) und weiterer Werke der europäischen Kunst aus dem 16. - 19. Jahrhundert. Unter anderem gehört sie zu den fünf größten Intituten dieser Art in der Tschechischen Republik. Wie schon der Name andeutet, wurde die Galerie nach dem südböhmischen Maler Mikoláš Aleš benannt.
Der Hauptsitz der Galerie ist die Reitschule des Schlosses Hluboká nad Vltavou (Frauenberg). Im Jahr 1967 wurde eine auf Keramik orientierte Zweigstelle errichtet, die sich im Gebäude der ehemaligen Schlossbrauerei in Bechyně befindet. Auch in České Budějovice wurde das Wortner-Haus AJG zum Zweck der Ausstellungen geöffnet. Das erfährt jedoch seit 2018 eine umfangreiche Renovierung.
In der Galerie sind sowohl eine Dauerausstellung, als auch Saisonausstellungen zu sehen. Auf Kunst ist auch die hiesige umfangreiche Bibliothek ausgerichtet, die der Öffentlichkeit frei zugänglich ist. Außer den Ausstellungen finden hier weitere Begleitprogramme wie Konzerte, Vernissagen oder Kurse für bildende Kunst statt.